原理からよくわかると大好評の実験入門書，待望の改訂第３版！大腸菌の培養法やサブクローニング，PCRなどの実験のポイントをイラストを用いて丁寧に解説．基本となる実験手技がしっかり身につきます！

第1章　実験をはじめるにあたって【田村隆明】
1 遺伝子実験とは
2 実験を組み立ててみる
3 実験法選択の基準
4 実験の上手な人はどこが違うのか
5 実験材料を準備する
6 遺伝子組換え実験関連法規
第2章　DNA実験の基本【田村隆明】
1 実験機具，機器
2 溶液

* 実験で使う水
* 準備する溶液
* 溶液の作り方

3 濃度と単位
4 滅菌操作
5 DNAの取扱い

* 一般的な注意点
* DNAを溶かす溶液

6 DNAの検出と定量

* DNAの紫外線吸収能
* 分光光度計
* エチジウムブロマイド

7 DNAの濃縮
7-1　エタノール沈殿
7-2　イソプロパノール沈殿
7-3　有機溶媒で濃縮する
8 DNAの精製
8-1　フェノール抽出

* Tris/フェノールの調製
* フェノール抽出の実際

8-2　フェノール/クロロホルム抽出
8-3　DEAE-セルロース
8-4　ゲル濾過
第3章　大腸菌の取扱い【田村隆明】
1 はじめに
2 大腸菌について

* 大腸菌とは
* 大腸菌の遺伝子型と菌株

3 培養の準備

* 培地の種類
* 培地添加物
* 培養容器
* インキュベーターとシェーカー
* 滅菌と殺菌
* 植菌器具
* 実験台のセットアップ

4 培地の作製

* 培地の基礎知識
* LB培地の作製
* LBプレートの作製
* M9培地の作製

5 いろいろな培養法
5-1　液体培地での培養

* 少量培養
* 大量培養

5-2　プレート培養

* 培地の乾燥
* 画線培養
* 塗り広げ培養
* 注ぎ込み培養
* マスタープレート作製
* スポット培養

5-3　大腸菌の増殖
5-4　培養後の後処理
6 菌株の保存と輸送

* プレート保存
* グリセロールストック
* スタブ保存
* 凍結乾燥法
* 輸送方法

第4章　バクテリオファージの取扱い【与五沢真吾】
1 はじめに
2 ファージ力価の測定（プラークアッセイ）
3 ファージの増殖
4 ファージDNAの調製
第5章　プラスミドDNAの増幅と精製 －DNAを増やす【与五沢真吾】
1 プラスミドとは
1-1　プラスミドの基礎知識
1-2　プラスミドベクターの選択
2 プラスミドの調製
2-1　プラスミド調製の原理
2-2　ボイルプレップ
2-3　アルカリプレップ

* ミニスケール（2 mL）
* ラージスケール（800 mL）

3 ポリエチレングリコール（PEG）によるプラスミド精製
4 市販のキットを使ったプラスミド精製
5 形質転換（トランスフォーメーション）
5-1　コンピテントセルの作製

* 塩化カルシウム法によるコンピテントセルの作製
* エレクトロポレーション用コンピテントセルの作製

5-2　形質転換（トランスフォーメーション）

* 塩化カルシウム法によるコンピテントセルを用いた形質転換
* エレクトロポレーション法による形質転換

第6章　核酸の酵素処理 －DNAを加工する
1 はじめに【中太智義】
2 制限酵素処理【中太智義】
2-1　制限酵素とその特性

* 制限酵素とは
* 認識配列
* 断片末端の構造
* 反応条件

2-2　制限酵素反応の実際

* 基本的な反応
* 異なる制限酵素で切断する場合
* その他の注意点

2-3　DNAをマッピングする
3 リガーゼ【中太智義】
3-1　DNAリガーゼ
3-2　T4 DNAリガーゼの性質
3-3　キットについて
4 DNA修飾酵素【中太智義】
4-1　アルカリホスファターゼ （alkaline phosphatase）
4-2　DNAメチラーゼ（DNA methylase）
4-3　クレノーフラグメント（Klenow fragment）
4-4　バクテリオファージT4 DNAポリメラーゼ（Bacteriophage T4 DNA polymerase）
4-5　バクテリオファージT4ポリヌクレオチドキナーゼ（Bacteriophage T4 polynucleotide kinase：T4 PNK）
5 ヌクレアーゼ【田村隆明】
5-1　S1ヌクレアーゼ
5-2　Mung Beanヌクレアーゼ
5-3　Bal31 ヌクレアーゼ
5-4　DNaseⅠ（デオキシリボヌクレアーゼⅠ）
5-5　エキソⅢヌクレアーゼ
5-6　ラムダエキソヌクレアーゼ
5-7　マイクロコッカルヌクレアーゼ
5-8　RNase H
6 DNA合成酵素【田村隆明】
6-1　末端デオキシヌクレオチド転移酵素
6-2　逆転写酵素
第7章　DNA断片のサブクローニング －目的のDNAを手に入れる
1 サブクローニングの流れ【中太智義】
2 インサートDNAの用意【中太智義】
3 ベクターの準備【中太智義】
3-1　制限酵素の選択とベクターの末端形状
3-2　脱リン酸化処理
3-3　ベクター調製の実際
4 ライゲーション【中太智義】
5 インサートDNAの修飾・改変【中太智義】
5-1　リンカーライゲーション
5-2　メチル化DNAを用いたリンカーライゲーション
5-3　突出末端の平滑化
5-4　DNAを削る
6 トランスフォーメーション （形質転換する）【中太智義】
7 インサートDNAのチェック
7-1　プラスミドの精製と制限酵素処理によるインサートチェック【中太智義】
7-2　カラーセレクション【中太智義】
7-3　PCRによるチェック【青木　務】
第8章　アガロースゲル電気泳動 －大きなDNA断片の分離
1 電気泳動の原理と種類【田村隆明】
2 アガロースを選択する【田村隆明】
3 試薬の調製【田村隆明】
4 電気泳動の実際【田村隆明】

* 通常ゲルの場合
* ミニゲル（MuPid®）を用いる方法

5 DNAの検出
5-1　エチジウムブロマイドによるDNAの検出【田村隆明】
5-2　エチジウムブロマイドを含むアガロースゲルによるDNAの分離【田村隆明】
5-3　SYBR®Green染色を用いたDNAの染色【小池千加】
6 アガロースゲルからのDNAの回収【田村隆明】
6-1　GENECLEAN®を用いる方法
6-2　QIAGENのスピンカラムを使う方法
6-3　それ以外のDNA回収方法
第9章　ポリアクリルアミドゲル電気泳動－小さなDNA断片の分離【小池千加】
1 ポリアクリルアミドゲルについて
2 試薬の調製
3 ゲルの作製
4 電気泳動の実際
5 DNAの検出
6 ポリアクリルアミドゲルからのDNAの回収
第10章　PCR法 －DNAを試験管内で増やす【青木　務】
1 PCR法の原理
2 プライマーのデザイン
2-1　Tmとプライマーのデザイン
2-2　構造上避けるべきデザイン
2-3　その他のデザイン上の注意点
2-4　nested プライマー
3 耐熱性ポリメラーゼの選択
3-1　polⅠ型DNAポリメラーゼ
3-2　α型DNAポリメラーゼ
3-3　混合型DNAポリメラーゼ（LA-PCR用ポリメラーゼ）
3-4　Hot start用DNAポリメラーゼ
4 PCR反応の実際
4-1　PCRに用いられる機器の分類

* 温度管理方式による分類
* オイルフリーかどうか
* 使用チューブ（プレート）の違い
* 冷却方式の違い

4-2　PCR反応液の組成
4-3　サイクルの設定

* プライマーのアニール温度
* 各ステップの時間
* サイクル数
* 代表的なPCRサイクル
* 修飾を加えたサイクル

4-4　PCR反応の例
4-5　コンタミネーションの防止について

* 試薬
* ピペッティング
* ネガティブコントロール

4-6　Hot start

* 後から成分を添加する方式
* ワックスで隔壁を作る方式　
* Hot start用ポリメラーゼを用いる方式

5 PCR産物のサブクローニング
5-1　PCR産物の精製
5-2　平滑末端化
5-3　TAクローニング法

* TAベクターの作製
* TAベクターへのサブクローニング

5-4　制限酵素認識配列の付加